Formation de membranes lipidiques sur support solide et assemblage bidimensionnel de protéines.

Abstract

Les membranes lipidiques déposées sur support solide sont couramment utilisées comme modèle de membranes cellulaires et présentent des applications potentielles dans le domaine des biotechnologies. Ce travail de thèse a permis de caractériser, en détail, les processus de dépôt de liposomes et la formation des bicouches lipidiques supportées (SLBs) sur support de mica et de silice. L'influence de la charge des lipides et le rôle des ions Ca2+ dans la formation des SLBs ont été caractérisés. De plus nous avons réalisé une étude de la liaison spécifique et de l'autoassemblage de la protéine annexine A5 sur les SLBs. Les deux principales techniques de caractérisation utilisées pour cette étude sont la microscopie à force atomique (AFM) et la microbalance à cristal de quartz avec mesure de dissipation (QCM-D). Les obstacles techniques majeurs associés à l'imagerie par AFM des assemblages lipidiques ont été résolus. L'utilisation en parallèle des techniques QCM-D et AFM sur support de mica a été mise au point. La complémentarité de ces deux techniques a permis de caractériser la cinétique et de visualiser les structures intermédiaires formées lors des processus d'auto-organisation bidimensionnelle des lipides et des protéines.