Etudes de marqueurs biochimiques de pollution chez le molusque bivalve d'eau douce Corbicula Fluminea (Muller) - Purification et caractérisation des Glutathions-Transférases
Thèses de doctorat
Date de soutenance
2001-11-29Résumé
Notre travail s'inscrit dans une démarche de validation du mollusque bivalve Corbicula fluminea comme organisme sentinelle des milieux dulçaquicoles. Nous avons étudié les réponses de plusieurs biomarqueurs potentiels de ...Lire la suite >
Notre travail s'inscrit dans une démarche de validation du mollusque bivalve Corbicula fluminea comme organisme sentinelle des milieux dulçaquicoles. Nous avons étudié les réponses de plusieurs biomarqueurs potentiels de pollution (composants du métabolisme de (dé)toxication des phases I et II, indicateurs de stress oxydatif, activité propionylcholinestérase) après exposition à des conditions naturelles ou contrôlées. Au préalable, nous avons optimisé les conditions de dosage de l'activité enzymatique des glutathion S-transférases (GSTs,enzymes de phase II) envers plusieurs substrats, puis purifié et caractérisé trois isoenzymes cytosoliques de la masse viscérale. La variabilité saisonnière des biomarqueurs de pollution ainsi que leur sensibilité à différents facteurs abiotiques peuvent masquer ou fausser les effets des contaminants. Afin de les connaître nous avons étudié les variations saisonnières des différents paramètres et les effets en laboratoire de la température, du pH, de l'oxygénation, du type d'eau et du sédiment sur leurs réponses. Dans les deux cas, les activités catalase, propionylcholinestérase et NADH-cytochrome c réductase ont présenté une forte variabilité, au contraire des activités GSTs et NADPH-cytochome c réductase. Après exposition en laboratoire à plusieurs contaminants(trichloroéthylène, toluène, chlorure de cadmium, coupe de goudron de houille), la plupart des paramètres biochimiques ont présenté des variations significatives. L'approche multibiomarqueurs nous a permis d'obtenir des profils de réponses spécifiques pour chacun des contaminants étudiés. De plus, une étude de terrain sur un site industriel a démontré son efficacité pour évaluer la contamination des écosystèmes aquatiques. Au vu de l'ensemble des résultats obtenus, C.fluminea pourrait constituer un organisme sentinelle satisfaisant. Des études complémentaires en mésocosmes sont désormais nécessaires afin de confirmer ces résultats.< Réduire
Résumé en anglais
Our work belongs to a program of validation of the mollusc bivalve Corbicula fluminea as a sentinel organism of freshwater ecosystems. We studied responses of several potential pollution biomarkers (components of ...Lire la suite >
Our work belongs to a program of validation of the mollusc bivalve Corbicula fluminea as a sentinel organism of freshwater ecosystems. We studied responses of several potential pollution biomarkers (components of (de)toxification metabolism of phases I and II, indicators of oxidative stress, propionylcholinesterase activity) after exposure to natural or controlled conditions. At first, we have optimised assay conditions of enzymatic activity of glutathione S-transferases (GSTs, enzymes of phase II) towards several substrates and then purified and characterised three cytosolic isoenzymes from visceral mass. Seasonal variability of pollution biomarkers as well as their sensibility to different abiotic factors can occult or distort effects of contaminants. To know them, we studied seasonal variations of the different parameters and laboratory effects of temperature, pH, oxygenation, water-type and sediment on their responses. In both cases, catalase, propionylcholinesterase and NADH-cytochrome c reductase activities displayed high variability, contrary to GST and NADPH-cytochrome c reductase activities. After a laboratory exposure to several contaminants trichloroethylene, toluene, cadmium chloride and a coal tar fraction), most of biochemical parameters exhibited significant variations. The multibiomarker approach made possible the obtention of response profiles specific to each contaminant. Moreover, a field study around an industrial site attested its efficacy to assess contamination of aquatic ecosystems. Considering our whole results, C.fluminea could be an acceptable sentinel organism. Henceforth, complementary studies in mesocosms are needed to confirm these results.< Réduire
Mots clés
Ecotoxicologie
biomarqueurs
bivalve
environnement
eau douce
chlorure de cadmium
(dé)toxication
Corbicula fluminea
glutathion S-transférases
hydrocarbures aromatiques polycycliques
purification
lac
mollusque
pollution
rivière
toluène
trichloroéthylène
Unités de recherche