Microenvironnement médullaire et résistance à la Midostaurine dans les leucémies aiguës myéloïdes FLT3-ITD Identification de cibles thérapeutiques par criblage génomique fonctionnel

Abstract

Les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) sont des hémopathies malignes agressives. Environ 30% des patients présentent des mutations ITD (Internal tandem reapeat) affectant le récepteur tyrosine kinase FLT3. Ces mutations sont associées à des résistances et à un taux de rechute important au cours des chimiothérapies (Aracytine + Anthracyclines). Des thérapies ciblées utilisant des inhibiteurs de tyrosine kinase (ITK) tels que la Midostaurine ont permis d’améliorer la survie des patients. Malgré cela, le traitement des LAM, reste un véritable défi en raison des rechutes persistantes. Caractériser les mécanismes moléculaires intervenant dans la résistance à ces traitements ciblés est devenu un enjeu majeur. Afin d’identifier dans les LAM FLT3-ITD les gènes impliqués dans la résistance à la Midostaurine, nous avons effectué un criblage génomique fonctionnel par CRISPR-Cas9. Ce criblage a été réalisé dans la lignée MV4 ;11 (positive pour FLT3-ITD) dans des conditions de culture mimant le microenvironnement médullaire. Ce dernier est impliqué dans les mécanismes de résistances. Parmi les cibles identifiées, deux gènes candidats ont été évalué individuellement : SLC4A2 et ADAM22. Leur invalidation génomique dans la lignée MV4 ;11 a conduit à une augmentation de la sensibilité à la Midostaurine. Leur rôle fonctionnel sera confirmé ex vivo et in vivo. Ces travaux ont pour objectif d’identifier des cibles thérapeutiques potentielles afin de développer de nouvelles thérapies ciblées ou de mettre en évidence des repositionnements de médicaments. L’utilisation synergique de ces diverses thérapies permettra de surmonter les résistances et d’améliorer la prise en charge des patients atteints de LAM FLT3-ITD