Transfert de résistance aux antibiotiques par conjugaison chez Mycoplasma hominis
Langue
FR
Thèse d'exercice
Date de soutenance
2021-10-19Spécialité
thèse d'exercice de pharmacie
Résumé
Les mycoplasmes, micro-organismes ubiquitaires, possèdent les plus petits génomes parmi les organismes vivants capables de réplication autonome. Il a longtemps été considéré que la réduction génétique était la seule force ...Lire la suite >
Les mycoplasmes, micro-organismes ubiquitaires, possèdent les plus petits génomes parmi les organismes vivants capables de réplication autonome. Il a longtemps été considéré que la réduction génétique était la seule force régissant leur évolution. Cependant, une étude de génomique récente a révélé la présence d’ICE (integrative conjugative element) chez Mycoplasma hominis, suggérant que cette espèce pourrait être capable de transfert horizontal de gènes. L’objectif de ce projet est de déterminer si les ICEs de M. hominis sont fonctionnels, c’est-à-dire s’ils sont capables de conjuguer. Deux stratégies de transfert conjugatif ont été réalisées : une conjugaison inter-espèce entre M. agalactiae et M. hominis, deux espèces proches phylogénétiquement, et une conjugaison intra-espèce chez M. hominis. Les essais réalisés n’ont pas permis, à ce jour, d’obtenir des transconjugants. D’autres essais sont nécessaires afin de trouver les conditions dans lesquelles M. hominis serait capable de conjuguer. La modification de certains paramètres tels que la phase de croissance, le ratio donneur/receveur, le choix des souches et/ou la modification du protocole comme l’utilisation de polyéthylène glycol, la réalisation d’une conjugaison en milieu solide à l’aide d’un filtre ou d’une culture cellulaire sont envisagés. Néanmoins, il se peut que nos deux stratégies de transfert conjugatif n’aboutissent jamais, notamment car nous ne possédons pas de souche de M. hominis portant un ICE lui-même marqué par un gène de résistance aux antibiotiques permettant de suivre les éventuels transferts. L’obtention d’une telle souche par transformation bactérienne serait notre meilleure chance de mettre en évidence le phénomène transfert conjugatif au sein de l’espèce M. hominis.< Réduire
Résumé en anglais
Mycoplasmas are widespread microorganisms harboring the smallest genomes among living organisms capable of autonomous replication. It has long been considered that genetic reduction was the only driven force of mycoplasma ...Lire la suite >
Mycoplasmas are widespread microorganisms harboring the smallest genomes among living organisms capable of autonomous replication. It has long been considered that genetic reduction was the only driven force of mycoplasma evolution. However, a recent genomic study revealed the presence of integrative conjugative elements (ICEs) in Mycoplasma hominis suggesting that these bacteria would be able of horizontal gene transfers. The aim of this project was to determine if M. hominis’s ICEs were functional, i.e. if they were able to conjugate. Two conjugative transfer strategies were performed: an interspecies conjugation between M. agalactiae and M. hominis, two phylogenetically close species, and an intraspecies conjugation within the M. hominis species. Unfortunately, our experiments have not yielded any transconjugants to date. Further tests are needed to determine the conditions under which M. hominis would be able to conjugate. Modification of parameters such as growth phase, donor/recipient ratio, choice of strains and/or modification of the mating protocol with the use of polyethylene glycol, realization of mating experiments in agar medium using filter or using cell culture will have to be considered. Nevertheless, we cannot exclude that our two conjugative transfer strategies will never succeed because we don’t have any M. hominis strain marked in the ICE by an antibiotic resistance gene, which would allow following possible transfers. Obtaining this strain by bacterial transformation would be our best chance to demonstrate the phenomenon of conjugative transfer within the M. hominis species.< Réduire
Mots clés
Mycoplasma hominis
Éléments conjugatifs et intégratifs
Transfert horizontal de gènes
Tétracycline
Unités de recherche