Étude du rôle mémoire des lymphocytes T gd dans la réponse immunitaire dirigée contre le cytomégalovirus murin

Abstract

Depuis 20 ans, les recherches menées dans notre laboratoire ont permis d’asseoir le rôle protecteur antiviral des lymphocytes T gd (LT gd) dans la réponse immunitaire dirigée contre le cytomégalovirus (CMV) chez l’Homme et la souris. Les CMV sont des B-herpèsvirus spécifiques d’espèces ayant co-évolués avec leur hôte pendant des millions d’années. Après l'infection primaire, le virus persiste en tant qu'agent pathogène latent avec une expression limitée de protéines virales, conduisant au maintien à long terme d’un pool important de LT ab effecteurs mémoires (TEM) spécifiques du virus, exprimant le récepteur inhibiteur KLRG1. Ce phénomène est connu sous le nom « d’inflation ». Néanmoins, dans le cas où l’immunité est altérée comme chez les transplantés d’organes, une réactivation virale peut survenir. Cette dernière peut être associée à une augmentation de la mortalité ce qui oblige à traiter les patients avec des antiviraux préventifs toxiques et couteux. De façon intéressante, même en absence de traitement, 50% des receveurs séropositifs pour le CMV (R+) ne développent pas d’infection à CMV après transplantation parce qu’ils ont développé une mémoire antivirale. Les résultats chez l’Homme suggèrent que les LT gd EM différenciés de manière terminale pourraient participer à cette immunité à long-terme.Un des projets de l’équipe a pour but de tester la capacité des LT gd à mettre en place une réponse mémoire anti-CMV, afin de pouvoir à terme identifier des alternatives à l'utilisation des traitements actuellement utilisées en transplantation. En parallèle des études chez les receveurs d’allogreffes, nous avons choisi d’utiliser le modèle murin qui autorise des infections répétées et un accès aux organes, et des souris déficientes en LT ab (TCRa-/-). Ces souris survivent à l’infection à CMV contrairement à des souris sans LT (CD3e-/-). Les LT gd pourraient ainsi avoir un rôle compensateur dans un contexte où l’activité des LT ab serait affectée.Afin d’appréhender l’existence d’une réponse mémoire impliquant les LT gd, les souris TCRa-/- ont été primo-infectées puis, 3 mois plus tard, réinfectées avec une même dose de CMV. De façon intéressante, l’augmentation des LT gd est plus importante et associée à un meilleur contrôle de la charge virale dans le foie et les poumons comparativement à une infection primaire. Cette réponse concerne plus particulièrement des LT gd TEM qui co-expriment KLRG1 et CX3CR1, principalement localisés dans la circulation et au niveau vasculaire au sein des tissus. Ces LT gd possèdent par ailleurs des caractéristiques phénotypiques et transcriptomiques d’effecteurs cytotoxiques. Dans un second temps, nous avons montré qu’un transfert adoptif de LT gd induits à long-terme par le CMV, confère une protection à des hôtes CD3e-/-, contrairement à des LT gd isolés d’une souris non infectée de même âge. Afin d’identifier la sous-population mémoire efficace, nous avons effectué des transferts de LT gd centraux mémoires (TCM) ou TEM. Comparativement aux TEM, les gd TCM possèdent un plus grand pouvoir proliférateur in vitro et une meilleure survie in vivo. Nous avons également montré leur capacité à générer des gd TEM in vivo, probablement impliqués dans la réponse antivirale. En effet, un blocage à court terme de la circulation des TCM n’affecte pas la prise en charge du virus dans les organes de souris primoinfectées.Enfin nous avons montré une implication du TCR gd dans le contrôle de la charge virale en réinfection. Nos études par NGS ont montré un remaniement du répertoire des TCRd consécutif à l’infection, avec une diminution de la proportion des clones publics comparativement aux souris contrôles. Ces résultats et l’absence de restriction du répertoire observée suggèrent une mobilisation de clones privés reconnaissant des antigènes différents. La spécificité antigénique de cette réponse mémoire reste encore à être déterminée.