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dc.contributor.advisorBaret, Jean-Christophe
dc.contributor.authorVIGNE, Aurélie
dc.contributor.otherBaret, Jean-Christophe
dc.contributor.otherZakri, Cécile
dc.contributor.otherFranke, Thomas
dc.contributor.otherNghe, Philippe
dc.contributor.otherRobinson, Tom
dc.contributor.otherLe Goff, Anne
dc.date2018-12-17
dc.identifier.urihttp://www.theses.fr/2018BORD0391/abes
dc.identifier.uri
dc.identifier.urihttps://tel.archives-ouvertes.fr/tel-02049051
dc.identifier.nnt2018BORD0391
dc.description.abstractCette thèse concerne le développement d’outils microfluidique pour l’ingénierie d’enzymes d’intérêt thérapeutique. La microfluidique à base de gouttelettes présente un énorme potentiel dans le domaine de la biologie quantitative. Nous développons des outils microfluidiques pour l’évolution dirigée de l’enzyme L-asparaginase, enzyme utilisée comme traitement de laleucémie lymphoblastique aiguë. Ce traitement est basée sur une enzyme d’origine bactérienne,ce qui conduit à déclencher des réactions immunitaires qui se traduit par l’interruption du traitement, souvent fatale pour le patient. Cependant, une version humaine de l’enzyme L-asparaginase, qui est moins immunogénique, n’est à l’heure actuelle pas suffisamment active pour être utilisée. L’objectif principal de cette thèse est d’alors d’analyser et de cribler des banques de mutants d’enzymes en utilisant des méthodes classiques de mutagenèse et d’analyser chaque mutant individuellement par le biais de la microfluidique. Pour cela, plusieurs systèmes microfluidiques ont été développés et optimisés afin de répondre à différents critères de sélection pour l’analyse et la sélection de l’enzyme L-asparaginase. La version bactérienne a servi de contrôle positif pour l’optimisation des systèmes microfluidiques afin de pouvoir analyser et de cribler des banques de mutants de la version humaine de l’enzyme L-asparaginase.
dc.description.abstractEnThis thesis deals with the development of microfluidic tools for the engineering ofenzymes of therapeutic interest. Droplet microfluidics has enormous potential in the field ofquantitative biology. We are developing microfluidic tools based on the directed evolutionof the enzyme L-asparaginase, an enzyme used to treat acute lymphoblastic leukemia. Thistreatment is based on an enzyme of bacterial origin, which leads to immune reactions thatresult in the interruption of treatment, often fatal for the patient. However, a human version ofthe enzyme L-asparaginase, which is less immunogenic, is currently not sufficiently active to beused. The main objective of this thesis is to analyze and screen enzyme mutant libraries usingstandard mutagenesis methods and to analyze each mutant individually through microfluidics.For this, several microfluidic systems have been developed and optimized for different selectioncriteria for the analysis and selection of the enzyme L-asparaginase. The bacterial versionserving as a positive control for the optimization of microfluidic workflows to analyze andscreen mutant libraries of the human version of the enzyme L-asparaginase.
dc.language.isofr
dc.subjectMicrofluidique en gouttes
dc.subjectÉvolution dirigée
dc.subjectEnzymes
dc.subjectAnalyses à l'échelle de la cellule unique
dc.subjectOnde acoustique de surface
dc.subject.enDroplet based microfluidic
dc.subject.enDirected evolution
dc.subject.enEnzymes
dc.subject.enSingle cell analysis
dc.subject.enSurface acoustic waves
dc.titleOutils microfluidiques pour l'ingénierie d'enzymes d'intérêt thérapeutique
dc.title.enMicrofluidic tools for the engineering of enzymes of therapeutic interest
dc.typeThèses de doctorat
dc.contributor.jurypresidentZakri, Cécile
bordeaux.hal.laboratoriesCentre de Recherche Paul Pascal (Pessac)
bordeaux.institutionUniversité de Bordeaux
bordeaux.institutionCNRS
bordeaux.type.institutionBordeaux
bordeaux.thesis.disciplinePhysico-chimie de la matière condensée
bordeaux.ecole.doctoraleÉcole doctorale des sciences chimiques (Talence, Gironde)
star.origin.linkhttps://www.theses.fr/2018BORD0391
dc.contributor.rapporteurFranke, Thomas
dc.contributor.rapporteurNghe, Philippe
dc.contributor.rapporteurRobinson, Tom
bordeaux.COinSctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info:ofi/fmt:kev:mtx:journal&rft.title=Outils%20microfluidiques%20pour%20l'ing%C3%A9nierie%20d'enzymes%20d'int%C3%A9r%C3%AAt%20th%C3%A9rapeutique&rft.atitle=Outils%20microfluidiques%20pour%20l'ing%C3%A9nierie%20d'enzymes%20d'int%C3%A9r%C3%AAt%20th%C3%A9rapeutique&rft.au=VIGNE,%20Aure%CC%81lie&rft.genre=unknown


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