Mise en place du dosage enzymatique de l'activité de la Pyruvate kinase érythrocytaire sur l'Architect C16000

Abstract

Le déficit en pyruvate kinase est la seconde enzymopathie érythrocytaire la plus fréquente, bien que rare (<1/20 000), après le déficit en G6PD. Dû à un défaut du métabolisme énergétique du globule rouge par défaut de production d’ATP, le déficit est responsable d’une anémie hémolytique chronique dont la sévérité clinique et biologique est très variable d’un individu à l’autre. Son diagnostic est basé sur le dosage de l’activité enzymatique érythrocytaire pyruvate kinase par méthode spectrophotométrique. Mon travail de thèse a consisté à la mise en place du dosage enzymatique de l’activité pyruvate kinase érythrocytaire sur Architect C16000, en utilisant les kits de réactifs Biosentec au laboratoire d’hématologie du CHU de Bordeaux. Les résultats des dosages, effectués du 21 septembre au 20 novembre 2020, s’inscrivent dans le cadre de la validation de méthode en vue de son accréditation, en accord avec le document SH-GTA 04 selon les normes NF EN ISO 15189. L’activité pyruvate kinase a été interprétée avec le résultat du dosage seul et sous forme de ratios en tenant compte de l’activité de d’autres enzymes érythrocytaires déjà mises en place au CHU : glucose-6-phosphate deshydrogénase et aspartate aminotransférases érythrocytaire.