Implication de la protéase de l'Adénovirus dans le désassemblage partiel de la capside et le relargage de la protéine VI

Abstract

L’Adénovirus est un virus non-enveloppé qui entre dans les cellules par endocytose après reconnaissance aux récepteurs cellulaires. Pendant cette étape d’entrée, la capside subit un désassemblage partiel à l’intérieur de l’endosome qui permet la libération de la protéine VI. Cette protéine est responsable de la lyse de la membrane de l’endosome, permettant ainsi à la capside de s’échapper de l’endosome pour accéder au cytosol et être transportée vers l’enveloppe nucléaire via les microtubules. Les mécanismes cellulaires et / ou viraux permettant ce désassemblage partiel ne sont pas entièrement compris. Le projet vise à investiguer le rôle potentiel de la protéase de l’Adénovirus (AVP) dans cette étape d’entrée. L’AVP est une protéase à cystéine produite dans une forme inactive et incorporée dans les capsides comme une protéine de liaison à l’ADN, indépendamment de sa séquence. Une fois activée par deux cofacteurs, elle permet le clivage de différentes protéines via une réaction biochimique à une dimension. Cette étape, appelée maturation, se produit suite à / pendant l’assemblage de la capside dans la cellule infectée et rend la capside moins stable, ce qui est essentiel pour l’infectivité du virus. Un mutant de l’Adénovirus qui n’incorpore pas l‘AVP est donc composé de protéines non clivées et possède par conséquent une capside hyperstable. Ce mutant est ainsi incapable de libérer la protéine VI dans l’endosome et est dégradé par la voie lysosomale. Nous avons produit et purifié l’AVP afin de développer un test de maturation in vitro des protéines virales et apporter une meilleure compréhension de son rôle potentiel dans le désassemblage partiel de la capside. Nous avons identifié un nouveau site de clivage fonctionnel d’une protéine de la capside qui pourrait être un des déclencheurs de la libération de la protéine VI. Nous combinons des approches de biochimie et de biologie cellulaire afin de confirmer que l’activité de clivage de l’AVP facilite l’entrée du virus.