Mise au point d'un test utilisant la micro-rhéologie et les propriétés structurelles du caillot pour aider à la compréhension des thromboses veineuses inexpliquées

Abstract

La thrombose veineuse profonde et l'embolie pulmonaire, appelées événements thromboemboliques veineux (ETEV), sont actuellement la troisième cause de décès cardiovasculaire dans le monde. Avec nos diagnostics actuels, nous ne comprenons pas la cause des ETEV chez environ 50% des patients. Une meilleure compréhension de leur étiologie serait un moyen de mieux les traiter et les prévenir. Pour compenser le manque de compréhension des causes de la thrombose avec les tests actuels, différentes approches sont développées : des tests de coagulation globaux tels que le test de génération de thrombine, l’étude de la fibrinoformation et de la fibrinolyse, des études de la structure du caillot et également de la rhéologie des caillots. Dans ce travail, nous avons exploré la structure et la rhéologie du caillot à l’échelle microscopique afin de caractériser des caillots pathologiques et tenter de définir des valeurs seuils mécano-structurelles dit « de risque », par le biais d’une méthode que nous avons développée. Tout d’abord, nous avons mis au point une méthode d’imagerie et d’analyse tridimensionnelle de la microstructure du réseau de fibrine en microscopie confocale et, en parallèle, développé et optimisé une méthode de caractérisation micro-rhéologique de caillots de plasma basée sur la mesure du mouvement brownien de billes micrométriques insérées dans le caillot (mesure des modules viscoélastiques). Nous avons ensuite mis au point un protocole de coagulation (adapté à notre question), nous permettant d’obtenir des caillots de plasma reproductibles. Enfin, nous avons voulu évaluer des paramètres mécano-structurels de caillots enrichis en facteurs de la coagulation (fibrinogène, FVIII, facteurs vitamino-K dependants (II, VII, IX, X), VIIa) et avons montré que les caillots enrichis en fibrinogène et FVIII étaient plus denses et plus rigides que les caillots contrôles. Nous avons souhaité effectuer nos tests sur des témoins individuels mais nous nous sommes confrontés à une grande variabilité inter-individuelle dans la mesure mécanique des caillots humains. Des mesures supplémentaires seront donc nécessaires pour valider cette mesure.