Implication du Fas ligand soluble dans les vascularites à ANCA

Abstract

Le CD95-ligand (CD95L) ou FasL est essentiellement étudié sous sa forme membranaire qui induit un signal de mort apoptotique lorsqu’il se lie à son récepteur CD95, exprimé à la surface des cellules de manière ubiquitaire. Cela entraine donc une élimination des cellules infectées ou tumorales mais également une régulation du système immunitaire.La forme membranaire du CD95L est donc largement décrite dans la littérature : suite à la liaison du CD95L à son récepteur, on assiste à une modification conformationnelle de CD95 qui se lie alors à la protéine adaptatrice FADD qui, à son tour, recrute la pro-caspase 8. Ce recrutement permettra la formation du complexe DISC (Death-Inducing Signaling Complex) permettant à la pro-forme de la caspase 8 de laisser place à sa forme active, induisant alors l’apoptose de la cellule d’intérêt. Cependant, il a été montré que le CD95L membranaire peut également être clivé par des métalloprotéases (MMP) pour générer un facteur soluble, le s-CD95L, circulant sous forme trimérique dans la circulation sanguine. Lors de sa liaison au récepteur CD95, le s-CD95L induira alors une signalisation non apoptotique. Dans ce cadre, la protéine FADD ne sera pas recruté et un complexe différent sera formé : le MISC (Motility-Inducing Signaling Complex). La phospholipase C gamma 1 sera également recrutée au niveau de la portion juxtamembranaire du CD95 intracytoplasmique, induisant une augmentation du signal calcique intracellulaire. La formation de ce nouveau complexe et ce signal joue notamment un rôle important dans la migration des lymphocytes Th17 chez les patients lupiques. Le DB550 est un peptide se liant à CD95 et permettant le blocage spécifique de l’interaction CD95-PLCgamma1 sans déstabiliser la formation du DISC ce qui signifie qu’il inhibe les voies non apoptotiques sans affecter les voies apoptotiques de la cellule. Le traitement de souris MRL/lpr (génétiquement prédisposées à développer une maladie proche du lupus) par le DB550 induit une amélioration globale de la maladie. Les vascularites à ANCA (VAA) constituent un groupe de maladies auto-immunes systémiques qui touchent les vaisseaux de petits calibres. A l’heure actuelle, les patients atteints de VAA sont traités par des immunosuppresseurs non spécifiques et présentent un taux de rechute encore très important. Il apparaît essentiel d’identifier une nouvelle cible thérapeutique plus spécifique. De ce fait, nous avons obtenu des résultats et observations chez les patients atteints de vascularite à ANCA : le taux de s-CD95L, au niveau sérique et tissulaire, est plus élevé chez les patients comparés à des sujets sains et ce taux est également corrélé à l’activité de la maladie. Nous avons pu mettre en évidence le mécanisme intracellulaire sous-tendant l’activation des polynucléaires neutrophiles suite à leur stimulation par le s-CD95L. En effet, ces derniers sont capables de migrer en fonction d’un gradient de s-CD95L et, dans un contexte plus inflammatoire, de produire une quantité importante d’espèces réactives de l’oxygène et de cytokines pro-inflammatoires ainsi que de potentiellement mettre en place des mécanismes induisant la production de NETs (Neutrophil Extracellular Traps).Enfin, dans un modèle murin de glomérulonéphrite induite, grâce au DB550, nous avons pu améliorer considérablement les symptômes de la maladie (diminution du nombre de croissants glomérulaires, de l’infiltration rénale).Ces résultats permettent la mise en évidence de l’implication du s-CD95L dans la physiopathologie des vascularites à ANCA et placent la voie de signalisation engagée CD95L soluble comme une potentielle cible thérapeutique pour ces maladies.